обнаруживаемым в терминальной части подвздошной кишки или в кале. Переваримость питательных веществ в рубце жвачных проводят методом in situ.
Таблица 3.4 – Метод in situ (или in sacco – в мешочке) для определения рубцовой переваримости белка у молочных коров
| Показатели | Рекомендации |
|---|---|
| Рацион: | |
| Тип | Типичный состав: СВ, СБ, НДК, СЗ |
| Уровень кормления | Обычный, надо знать ПСВ и рНрубца |
| Частота кормления | 2 раза в день, не кормить вволю |
| Оценка кормов: | |
| Химанализ | Минимум: СВ, СБ, НДК,СЗ |
| Физическая характеристика | Обработка кормов: tº, время |
| Технологическая подготовка образца | 2 мм сито на мельнице |
| Характеристика мешочка: | |
| Материал | Полистирол |
| Размер пор | От 40 до 60микрон (µ) |
| Процесс инкубации: | |
| Количество животных | 2, данные о живой массе |
| Количество дней | 2 |
| Количество повторностей | 1 |
| Предварительное смачивание | Рекомендуется |
| Положение в рубце | Вентральный рубец |
| Помещение в рубец/ изъятие из рубца | Удалять одновременно |
| Время инкубации, час | 0,2,4,8,16,24,48 (72 часа для грубых кормов) |
| Промывание | (5 раз, 1 минута/промывку) |
| Стандартный образец | рекомендуется |
| Микробная коррекция (поправка) | требуется |
| Математическая модель | нелинейная |
Переваримость в разных отделах пищеварительного тракта
Знание особенностей переваривания в разных участках пищеварительного тракта позволяет лучше понимать судьбу питательных веществ в процессе пищеварения. Например, углевод, такой как крахмал, может ферментироваться в рубце жвачных до ЛЖК и может перевариваться в тонком отделе до глюкозы.
Изучение переваримости в разных отделах пищеварительного тракта делают на канюлированных животных. У жвачных канюли устанавливают на рубец, 12-и перстную кишку (duodenum) и терминальный участок подвздошной кишки (ileum). Это позволяет изучать процессы ферментации в рубце, измерить переваримость на участках между же-
лудком, тонким и толстым кишечником, определить сколько переварилось сахара, крахмала, белка, небелковых азотсодержащих веществ, в каких отделах и в каком количестве они всосались. Так, кормовой белок может переходить в сычуг и дальше в тонкий кишечник в нераспавшемся виде, т.е. избежать микробной деградации, или, наоборот, покидать рубец в виде микробного белка, синтезированного в результате его деградации в рубце. Судьбу белка (N) рациона можно определить путем сбора химуса из смежных участков пищеварительного тракта.
Метод подвижных мешочков
Другая техника изучения переваривания корма в отделах пищеварительного тракта состоит в использовании небольших мешочков (2,5х5 см) из полистирола, подобных, как в методе in situ. В него помещают образец корма 0,5-1г и вводят через канюлю, например, дуоденум и извлекают через вторую канюлю, например, в терминальной части илеума ( на уровне илеоцекального сфинктера). Разницу количеств питательных веществ между этими участками берут для расчета переваримости и всасывания. Установка Т-образных канюль у свиней в терминальном илеуме применяется для получения так называемой илеальной переваримости аминокислот.
Методы определения переваримости in vitro
Проведение опытов по переваримости непосредственно на животных- процесс трудоемкий, поэтому предложены лабораторные методы in vitro, которые воспроизводят, насколько это возможно, условия переваривания в желудочно-кишечном тракте.
Переваримость корма для жвачных может быть измерена достаточно точно in vitro путем инкубации сначала в рубцовой жидкости, взятой у фистулированных животных, и затем пепсином. В период первой стадии двух стадийного метода in vitro мелко размолотый образец инкубируют в течение 48 часов в рубцовой жидкости в колбе в анаэробных условиях. Во вторую стадию бактерий убивают путем подкисления соляной кислотой до рH=2, затем перевар (вместе с недопереваренными белками) инкубируют пепсином в следующие 48 часов. Нерастворимые остатки отфильтровывают, высушивают и сжигают для определения золы. Органическое вещество определяют путем вычитания золы из навески корма и рассчитывают переваримость органического вещества.
Используемая рубцовая жидкость действует на переваривание неодинаково, поскольку её активность зависит от рациона, который поедает жвачное животное. В попытке получать более воспроизводимые данные рубцовую жидкость заменяют средой с препаратом целлюлазы грибного происхождения. После инкубации в среде с пепсином, на второй стадии остаток инкубируют в среде с целлюлазой.
Определение переваримости белка in vitro
Метод применяется для определения переваримости белка концентратов. Навеску 1г обезжиренной тонкомолотой муки зерна помещают в склянку емкостью 50-100 мл и добавляют солянокислый раствор пепсина (1,5 мг кристаллического пепсина растворяют в 15 мл 0,1н HCl, рH=1,2), что приблизительно моделирует условия ферментативного гидролиза в желудочно-кишечном тракте моногастричных животных. В склянку также добавляют 1 мл толуола в качестве антисептика. Инкубацию проводят в течении 3ч при +37°С при постоянном перемешивании и диализе против 0,1н HCl через целлофановую мембрану. После пепсинового гидролиза в емкость добавляют 7,5 мл 0,2н NaOH, чтобы довести рH до 8. Далее добавляют 7,5 мл раствора панкреатина в фосфатном буфере ( 4 мг панкреатина растворяют в 7,5 мл фосфатного буфера). Содержимое инкубируют в течение 24 часов при +37°С также при постоянном перемешивании и диализе против фосфатного буфера через целлофановую мембрану. Непереваренные белки осаждают 10% сульфосалициловой кислотой (50 мл) смесь центрифугируют, выпаривают.
Переваримость минеральных веществ
Эндогенные потери многих минералов, в частности, Ca, P, Mg, Fe с фекалиями весьма значительны. Они появляются в результате секреции в пищеварительный тракт, из которого не реабсорбируются. Например, у жвачных количество фосфора, секретируемое через слюну, бывает выше, чем количество фосфора, присутствующее в корме. Фекалии могут вытягивать минералы из организма,которые всосались в избыточном количестве и поэтому должны быть экскретированы.
По этой причине определение кажущейся переваримости минералов не представляет какого-либо значения. Для минералов важно определить истинную переваримость. Для этого необходимо уметь определить в фекалии ту часть минералов, которая поступила из тела (эндогенная). Такое разделение возможно с помощью радиоактивно меченых изотопов минеральных веществ. В практической деятельности о доступности минеральных веществ и оптимальном их уровне в рационе судят по их концентрации в сыворотке крови.
3.3. Истинная и кажущаяся переваримость
Определение количества переваренных веществ по разнице – потребленные вещества минус выделенные в кале – не дает представления об истинной переваримости корма. Во-первых, вопрос состоит в том, что метан, образованный у жвачных животных в рубце в результате ферментации углеводов, отрыгивается во внешнюю среду и не используется. Эти потери приводят к завышенным показателям переваримости углеводов и количества переваримой энергии. Академик А. П. Калаш-
