виде относительного лимфоцитоза (до 14 тыс/мкл, или 14 109 /л) за счет лимфоидных клеток, характерных для подозрительных по заболеванию по «лейкозному ключу». Обнаружить другие патологические изменения не удается.
Начальная стадия характеризуется отсутствием клинических признаков болезни, но более постоянными изменениями количественного и качественного состава крови. Число лейкоцитов колеблется от 15 до 40 тыс./мкл (15…40 109 /л), а среди лимфоцитов преобладают юные и средние клетки. Гематологические изменения могут многие годы оставаться стабильными. При этом общее состояние животного — упитанность, молочная продуктивность и воспроизводительная функция — не вызывают подозрений на лейкоз. Лишь при обострении хронического течения болезни могут появляться такие признаки, как снижение удоя, истощение и другие, и лейкозный процесс переходит в развернутую стадию.
Развернутая стадия характеризуется, кроме гематологических сдвигов, разнообразием специфических и неспецифических клинических признаков. У животного ухудшается общее состояние, отмечаются быстрая утомляемость, плохой аппетит, снижаются удои, прогрессирует истощение, наблюдается атония преджелудков, сменяющаяся диареей. Перкуссией нередко устанавливают увеличение сердца, число пульсовых ударов достигает 100…120 в мин, пульс слабого наполнения, волна малая. Сердечный толчок ослаблен. При сердечной слабости у животного развиваются отеки подкожной клетчатки в области подгрудка и межчелюстного пространства.
Специфическим клиническим признаком лейкозов крупного рогатого скота является прогрессирующее значительное увеличение поверхностных (околоушных, нижнечелюстных, за-
глоточных, предлопаточных, надвыменных и др.) лимфатических узлов. Отмечается симметричное, но неравномерное увеличение их. Лимфатические узлы достигают величины от 5 до 20 см и более, они безболезненные, подвижные, эластичной или плотной консистенции.
У молодняка наряду с увеличением лимфатических узлов в области голодной ямки, поясницы, шеи часто отмечают опухолевидные разрастания зобной железы, обусловливающие затрудненное дыхание. При значительном увеличении селезенки перкуссией устанавливают притупленный или тупой звук, в некоторых случаях болезненность. Возможен разрыв селезенки, и животное внезапно погибает вследствие внутреннего кровоизлияния. Отмечают также увеличение печени. В тяжелых случаях ее границы сдвигаются назад и вниз, что устанавливают перкуссией.
Значительное увеличение некоторых лимфатических узлов, а также опухолевых разрастаний в тазовой и брюшной областях можно установить при ректальном исследовании. У некоторых (3…5% случаев) больных лейкозами животных отмечают экзофтальм (пучеглазие).
При развернутой стадии лейкозного процесса отмечают лейкемическую картину крови (40 тыс. и более лейкоцитов в 1 мкл крови, т. е. более 40 109 /л), увеличение числа молодых, недифференцированных клеток в лейкоцитарной формуле (доля таких клеток может достигать 5%). Продолжительность этой стадии варьируется от нескольких месяцев до 1…2, иногда и 3 лет.
Терминальная (опухолевая) стадия лейкоза характеризуется дальнейшим развитием патологического процесса и более отчетливым проявлением клинических признаков: резким увеличением лимфатических узлов, которые могут заметно выступать на теле; отека-
ми подкожной клетчатки в области подгрудка, межчелюстного пространства, конечностей. Число лейкоцитов в крови иногда снижается, при этом преобладают их патологические формы. Это приводит к крайнему истощению органов кроветворения, блокаде иммунной системы и заканчивается смертью животного.
У крупного рогатого скота может встречаться кожная форма лейкоза. На теле животного появляются узелковые припухлости диаметром до 2,5 см, хорошо заметные на шее, спине, крестце и бедрах. В течение нескольких недель происходит облысение припухлости, ее поверхность покрывается корочкой, состоящей из эпителия и экссудата. Затем корочки отпадают, а облысевшие участки вновь покрываются шерстью. Однако через несколько месяцев после кажущегося выздоровления наступает рецидив с появлением тех же признаков болезни. Происходит инфильтративное поражение висцеральных органов, животное погибает.
У молодняка 4…12 мес. возраста энзоотический лейкоз крупного рогатого скота (ЭЛ КРС) встречается в 3 формах: мультицентрической (лимфосаркома, общая лимфаденопатия), тимусной (опухолевидное разрастание в нижней части шеи) и кожной (кожный лейкоз), протекающей с развитием инфильтративных разрастаний в коже. У некоторых животных отмечают пучеглазие из-за разрастания ткани в области глазной орбиты.
Патологоанатомические изменения. При патологоанатомическом исследовании выявляют увеличение лимфатических узлов, особенно средостенных и брыжеечных. Поверхность их разреза саловидная, рисунок немного или совсем стерт. Селезенка увеличена (длиной до 100 см). Поверхность разреза красная, сочная, зернистая. Увеличенные фолликулы обычно вишнево-красного,
серого, реже малиново-красного цвета. Диффузные и очаговые макроскопические изменения встречаются и в других органах: в сердце, сычуге, почках, легких, матке, кишечнике, а также в скелетных мышцах. Они имеют вид сала плотноватой консистенции.
При гистологическом исследовании выявляют системную диффузную лейкозную инфильтрацию во всех органах кроветворения: костном мозге, селезенке, лимфатических узлах, а также в пейеровых бляшках и солитарных фолликулах кишечника, печени, почках, сердце, легких, скелетной мускулатуре.
Установлено, что у крупного рогатого скота наиболее часто встречается лимфоидный лейкоз, чаще хронический, реже — острый, а также лимфосаркома. При остром лейкозе клеточный субстрат представлен лимфобластами, а при хроническом опухолевые клетки в основном дифференцированы.
Диагноз основан на результатах клинико-эпизоотологических, гематологических, патологоанатомических, вирусологических, серологических и гистологических исследований. Клинические признаки проявляются, как правило, к концу болезни, поэтому в диагностике заболевания они имеют лишь вспомогательное значение.
Для гистологического исследования направляют от павших или убитых животных кусочки (2 2 см) измененных органов, фиксированных 10%-ным раствором формалина.
Гематологическое исследование заключается в обнаружении в периферической крови повышенного числа лейкоцитов (в основном лимфоидного ряда) и слабодифференцированных клеток (родоначальных, пролимфоцитов, лимфобластов), а также полиморфных, атипичных клеток кроветворных органов.
Подсчет лейкоцитов проводят при помощи электронного счетчика или в камере Горяева, а процентное соот-
ношение отдельных форм лейкоцитов крови — в окрашенном мазке под микроскопом. Результаты гематологических исследований оценивают по так называемому «лейкозному ключу» и морфологическому характеру клеток крови.
Если количество лейкоцитов у животных будет:
-
› в возрасте от 2 до 4 лет ниже 11 000 в 1 мкл крови,
-
› в возрасте от 4 до 6 лет ниже 10 000 в 1 мкл крови,
-
› в возрасте от 6 лет и старше ниже 9000 в 1 мкл крови, то результат исследования на лейкоз считают отрицательным; если выше — то готовят мазки и определяют лейкоцитарную формулу. У быков-производителей во всех случаях независимо от числа лейкоцитов выводят лейкоцитарную формулу (Масимов Н. А., 2007). Предлейкозную стадию выявляют
-
серологическими и вирусологическими исследованиями, при этом никаких гематологических изменений нет.
Серологический метод диагностики основан на выявлении в сыворотке крови животных при помощи РИД антител к антигену ВЛ КРС. Специфические антитела появляются в крови крупного рогатого скота через 2 мес. после заражения, т. е. значительно раньше, чем гематологические изменения, и сохраняются пожизненно.
РИД представляет собой основной метод серологического исследования животных в государственных программах по борьбе с лейкозом крупного рогатого скота во многих странах, в том числе в России.
Кроме того, с этой целью возможно применение других реакций: связывания комплемента (РСК); иммунофлуоресценции (РИФ); радиоиммунопреципитации (РИП); нейтрализации (РН), иммуноферментного анализа (ИФА), полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Все перечисленные методы направлены на выявление антител к одному из двух структурных белков ВЛ КРС — gp24 и р51.
Широко используют РДП для обнаружения антител, которые проявляются через 2…4 мес. после инфицирования животных.
Животных, давших положительные результаты в РИД, считают инфицированными. Животных с гематологическими изменениями в картине крови или с клиническими признаками считают больными лейкозом.
При начальной стадии лейкоза отмечают количественные и качественные сдвиги в составе клеток крови; увеличивается число лейкоцитов, повышается процент лимфоцитов, появляются малодифференцированные, незрелые, разной величины, патологические формы клеток.
Развернутая стадия характеризуется, кроме гематологических сдвигов, клиническими признаками: ухудшается общее состояние, снижаются удои, наблюдается истощение, ослабление работы сердца, часто обнаруживают увеличение лимфатических узлов (они безболезненны, подвижны, эластичны), внутренние лимфатические узлы поражаются чаще поверхностных.
При терминальной стадии инфекции быстро развивается болезнь, отмечается истощение кроветворных органов, сопровождающееся блокадой иммунной системы и гибелью животного.
Животное считают больным лейкозом при наличии одного из следующих показателей:
1) клинических признаков болезни;
2) положительных результатов гематологических исследований;
3) обнаружении у павшего (убитого) животного характерных патологоанатомических изменений;
4) установлении положительного результата гистологического исследо-
