вом случае используют животных с изолированным желудком (рубцом) по Павлову или с изолированными участками кишечника по Тири, Тири—Велла, Синещекову*. Во втором случае применяют методику «вывернутых мешочков» с инкубацией последних в буферных растворах с разными концентрациями исследуемого элемента. Этот вариант методики был, в частности, эффективно использован для выяснения механизма активного транспорта кальция через кишечную стенку.
Получение через фистулу содержимого преджелудков (у жвачных) и толстого кишечника с последующим его анализом или инкубацией in vitro в присутствии разных доз макро- или микроэлементов. Этим методом изучают роль микрофлоры пищеварительного тракта животных в трансформации питательных веществ корма и значение минеральных элементов в этих процессах. Обычно используются различные варианты «искусственного рубца» с инкубацией цельного рубцового содержимого или отмытых клеток микроорганизмов в обогащенном буферном растворе (см. раздел 2.3.6).
Исследование содержания макро- и микроэлементов в «критических» органах и тканях (печени, костях, коже и пр.), полученных при убое животных или путем биопсии. Методику убоя используют при работе с лабораторными, мелкими сельскохозяйственными животными и птицей. Для получения достоверных данных необходима однородная популяция и достаточная численность животных (желательно не менее пяти на точку), подбор их по полу и весовым показателям. Эта методика предпочтительна при работе с молодняком.
Преимущество метода биопсии состоит в том, что он позволяет исследовать содержание микроэлементов или ферментов, влияющих на их обмен, у одних и тех же животных при разных физиологических состояниях (в процессе роста, во время беременности и лактации, в летнепастбищный и зимнестойловый периоды и т. д.). Взятие проб кожи и мышечной ткани затруднений не представляет. То же можно сказать и о пункционной биопсии печени с использованием специального троакара при соответствующем навыке экспериментатора [22, 28, 30]. В частности, в наших опытах систематический (с месячного до 6-месячного возраста телят) отбор проб печени, мышц и кожи не вызывал никаких отклонений в их росте и развитии.
Определение динамики минеральных элементов в пищеварительном тракте животных с внешними кишечными анастомозами. Метод внешних анастомозов позволяет получить представление об обменной функции пищеварительного канала в отношении минеральных веществ. Этим методом было показано, в частности, что некоторые минеральные вещества содержатся в химусе в зна-
*** У мелких животных нередко изолируют лигатурами участки кишечника in vivo в остром опыте.**
чительно больших количествах, чем поступает скормом (табл. 12). Интенсивность обмена между пищеварительным трактом и кровью неодинакова в разных его участках и зависит от состава рациона. Наличие у жвачных двух анастомозов (дуоденального и илеоцекального) дает возможность проследить за превращениями минеральных веществ в разных звеньях пищеварительного тракта (сложном желудке, тонком и толстом отделах кишечника).
12. Роль пищеварительного тракта в обмене минеральных элементов [19]*
| Показатели | Р, г | К, г | Na, г | Са, г |
|---|---|---|---|---|
| Поступило с кормом | 58,72 | 175,92 | 36,92 | 58,82 |
| Прошло в химусе | 108,74 | 181,50 | 257,25 | 61,71 |
| Выделено с соками** | 50,02 | 5,58 | 220,33 | 2,89 |
| Выделено с калом | 35,07 | 31,03 | 19,89 | 39,28 |
| Всосалось из переваренных кормов | 23,65 | 144,89 | 17,03 | 19,54 |
| Фактически всосалось | 73,67 | 150,47 | 37,36 | 22,43 |
*** Данные получены в опыте на корове с дуоденальным анастомозом.**
**** Возможна и прямая экскреция элементов через стенку кишечника.**
Изучение in vitro или in vivo влияния добавок микроэлементов на ферментативную активность пищеварительных соков. Этим методом получают чистые пищеварительные соки (желудочный, поджелудочный, кишечный) у фистульных животных и изучают их ферментативную активность при разных режимах минерального питания животных или при добавлении в инкубируемую среду (субстрат + сок) различных доз микроэлементов.
Метод позволил установить стимулирующее влияние на активность пищеварительных соков Zn 2+, Со 2+, M n 2 + , Cr 3+, SeOl + и других ионов.
УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ
I. Алиев А. А. Оперативные методы исследования сельскохозяйственных животных. Л., «Наука», 1974. 2. Аммерман К- — «Сельское хозяйство за рубежом. Животноводство», 1966, № 8. 3. Барнет А., Рейд Р. — В кн.: Физиологические основы рационального кормления жвачных животных. М., «Колос», 1964, с. 20—46. 4. Басоло Ф., Мирсон Р. Механизмы неорганических реакций. М., «Мир», 1971. 5. Бергельсон Л. Д. Биологические мембраны. М., «Наука», 1975. 6. Георгиевский В. И., Аюпов Ф. Г. — «Доклады ТСХА», 1971, вып. 167. 7. Гжицкий С. Г., Скороход И., Малик О. Г. и др. — В сб.: Повышение эффективности использования питательных веществ рационов. М., «Колос», 1972, с. 13—25. 8. Джонсон Р.— В кн.: Методы научных исследований в животноводстве. М., «Колос», 1975, с. 385—423. 9. Дрибицкас В. — В сб.: Биологическая роль микроэлементов и их применение в сельском хозяйстве и медицине (тез. докл. VI Всесоюзн. совещ.). Л., «Наука», 1970, с. 391. 10. Жеребцов П. И., Вракин В. Ф., Шевелев Н. С.— «Изв. Тимирязевской с.-х. академии», 1970, № 4, с. 159—170.
II. Касавина Б. С, Торбенко В. П. Жизнь костной ткани. М., «Наука», 1970. 12. Ковальский В. В., Блохина Р. И. — Проблемы эндокринологии и гормо-
нотерапии, 1963, № 6, с. 42—46. 13. Коттон Ф., Уилкинсон Дж. Современная неорганическая химия. Пер. с англ. Ч. I. М., «Мир», 1969. 14. Кочанов Н. Е. Кислотно-щелочное равновесие у жвачных животных. Л., «Наука», 1974. 15. Ньюман У, Ньюман М. Минеральный обмен кости. Пер. с англ. М., ИЛ, 1961. 16. Одынец Р. Н. — В сб.: Биологическая роль микроэлементов и их применение в сельском хозяйстве и медицине. М., «Наука», 1974, с. 396—401. 17. Плехан М. И. Химические свойства, методы выделения, очистки и анализа белковых гормонов. М., «Медицина», 1975. 18. Протасова Т. Н. Гормональная регуляция активности ферментов. М., «Медицина», 1975. 19. Синещеков А. Д. Биология питания сельскохозяйственных животных. М., «Колос», 1965. 20. Скорик Н. А., Кумок В. Н. Химия координационных изменений. М., «Высшая школа», 1975. 21. Уильяме Д. Металлы жизни. Пер. с англ. М., «Мир», 1975. 22. Уша Б. В. Болезни печени крупного рогатого скота. М., «Колос», 1969. 23. Чернавина И. А. Физиология и биохимия микроэлементов. М., «Высшая школа», 1970. 24. Эннисон Е. Ф., Льюис Д. Обмен веществ в рубце. Пер. с англ. М., Сельхозиздат, 1962. 25. Эскин И. А. Основы физиологии эндокринных желез. М., «Высшая школа», 1968. 26. Butler Е. J. — In: Physiology and Biochemistry of the Domestic Fowl. L Ed. Bell D. J., Freeman В. M. Ac Press, Lond—N-York, 1971. 27. Caldwell R., Hudson R. — Appl. Microbiol. 1974. v. 27, № 3, p. 549—552. 28. Charman H. L., Cox D. H., Haines С. E. et al. — J. Animal Sci., 1963, v. 22, p. 733. 29. O'Dell B. L., Campbell B. J . — I n : Comprehensive Biochemistry, vol. 21, Elsevier Fubl. Сотр. Amsterd., — Lond. — N-York, 1971, p. 179—266. 30. Erwin E. S., Dyer I. A., Meyer Т. O. et al. — J. Anim. Sci., 1956, v. 15, p. 428. 31. Gamble J. L. Clinical Anatomy, Physiology, and Pathology of Extracellular Fluid. Harv. Univ Press, 1954. 32. Guyton A. C. Textbook of Medical Physiology. 3-d. Ed. W. B. Saunders. Co., 1966. 33 Hill C , Matrone G. — Federal Proceed., 1970, v. 29, p. 1474. 34. Kratzer F. H., Ablred P. N., Davis B. J. et al. — J . Mutr., 1959, v. 68, p. 313. 35. Hubbert F., Cheng E., Burroughs W. — J . Anim. Sci., 1958, v. 17, p. 559. 36. KirchgeSner M., Grassman E . — In: Proceed. Int. Sympos. «Тгасе Element metabolism in animals». (Mills С F., Ed). Livingstone, Edinburgh a. London. 37. KirchgeBner M., Pallauf J. — Zuchtungskunde, 1973, H—45, № 3, S. 249. 38. Menke К. H., Sarif—Sarban M. — In: Trace Mineral studies with isotopes in domestic animals. Intern. Atom. Energy Agency, Vienna, 1969, p. 69—75. 39. Moodie E. W. et al. — J Expt. Physiol., 1963, v. 48, № 4, p. 100. 40. Nutrition of the Chicken (M. L. Scott., M. C. Nesheim. Eds.) Ithaka, New—York, 1969. 41. Thompson A. B. R., Velberg L. C , Sinelair D. G. — J. Clin. Investig, 1971, v. 50, № 11, p. 2384—2394. 42. Uesaka S., Kawashima R., Zembayashi M. —Bull. Res. Inst. Food Sci. Kyoto. Univ., 1966, v. 29, p. 27—32. 43. Vaugham I. H. The Physiology of bone. Oxford, Clarendon Press., 1970.*
